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面對新型冠性病毒,實驗室要如何做好細菌毒素污染措施?

相信這個鼠年的春節大家都過得很郁悶。
一場大概率由野生動物引起的新型冠狀病毒的大范圍傳播,讓全國人民面臨自2003年SARS病毒防疫戰以來又一次危險的境地。

很多網友請求說2020年能否重啟。


這次新冠病毒感染其中一個重要癥狀就是發熱發燒。
感染性發熱大家可能知道有些是因為細菌或者病毒等感染引起的,可是為什么這些細菌侵入人體后就會引起發熱呢?


由于病原微生物的代謝產物或其毒素作用于白細胞,白細胞吞噬病原微生物后崩解并釋放內源性致熱源,致熱源作用于體溫調節中樞從而引起發熱。
這些能與白細胞作用并引起發熱的物質稱為熱原,一般是微生物死亡裂解之后釋放出來。


當然細菌侵入人體不僅會引起高熱,還會有皮疹,寒戰,肝脾腫大等臨床癥狀。
因此對細菌等微生物的指標在各類攝入性和外用產品的生產質控中顯得尤為重要,藥典和各行業的國標都有相應的規定。畢竟如果細菌或熱原超標會對產品的質量造成影響。


若該產品是食品藥品等攝入性的產品或者用于醫療用途的產品,則會使人們健康至于危險的境地,這次新冠病毒肺炎就是如此。
就算是外用的例如化妝品,也會造成一定的危害。
因此,對細菌等微生物的滅菌操作就必不可少了。


我們就來說說滅菌這回事。
在生產中,細菌等微生物的來源十分廣泛:環境空氣、生產設備、生產用水(實驗用水)、原料、包裝材料、人員衣物等。

細菌普遍采用高壓蒸汽法滅菌,該方法相比于熱空氣法更為高效,相比化學試劑滅菌要環保,且沒有化學試劑滅菌殘留的缺點。


高壓蒸汽滅菌是應用最廣泛效果最可靠的方法,不僅能殺死一般細菌、真菌等微生物和大部分病毒(例如這次冠狀病毒)也能對芽孢和孢子有殺滅效果,因為水蒸氣通過生命體時液化放出大量的潛熱足可使蛋白質發生變性,進而導致細菌真菌或者病毒死亡。

《藥品生產質量管理規范》中提到實驗器具,潔凈服口罩以及動物廢棄物都需要經過高壓蒸汽滅菌(濕熱滅菌)121℃20min后才能繼續使用或者再處理。


廣州儀人儀器代理的日本雅馬拓科學YAMATO(大和科學)立式壓力滅菌器全世界最知名的滅菌器。

1921年研制出世界第一臺高壓滅菌器,作為高壓滅菌器的開拓者,雅馬拓生產的滅菌器一直質量的保證,廣受疾控,醫院,高校,第三方檢測的青睞。

2020年1月31日,李克強總理到訪的中國疾控中心,雅馬拓的一批高壓滅菌器早前已投入運行工作,為日常的實驗滅菌和這次疫情的實驗研究貢獻力量。

系列滅菌器取得《醫療器械注冊證》等多種證件,可用于醫療等多種用途。


相較于國某些滅菌器采用舊式的輪盤式蓋鎖的費力和存在安全隱患,YAMATO生產的滅菌器采用電子鎖和物理鎖雙重防護,設定只有機械鎖和電子鎖都鎖緊后才能運行,滅菌完成后腔內溫度降低到安全溫度,氣壓回復常壓時并且只能在通電情況下才能打開確保安全性,且開關操作簡單。

滅菌腔采用316L鏡面不銹鋼設計,耐污能力強;密封圈采用全硅膠密封確保最長時效的密閉效果;最高設計溫度達151℃,最高設計壓力達0.42MPa,計使用壽命20年;程序默認設有器具滅菌(默認121℃,20min可調)、液體滅菌(用于培養液)、滅菌保溫、溶解保溫和滅菌干燥程序等,一鍵快速運行;防干燒功能,超壓報警;可配置樣品溫度計顯示滅菌樣品的溫度,原廠滅菌指示卡檢驗滅菌效果;蒸汽采用內排方式靜音,實現無菌排放。


等等!!
你以為細菌病毒殺滅了就可以高枕無憂么?
細菌等微生物產生的代謝物或者死亡裂解后放出的物質就可以放過它們?
這些物質稱為熱原,也具有一定的毒害作用。

它們致熱能力最強的是革蘭氏陰性桿菌的產物,其次是革蘭陽性桿菌類,革蘭陽性球菌則較弱,霉菌、酵母菌、甚至病毒也能產生熱原。
革蘭氏陰性桿菌中最具有代表性為大腸桿菌。


由大多數革蘭氏陰性菌和少數革蘭氏陽性(如蘇云金芽孢桿菌)產生的熱原又稱為內毒素。
各種細菌的內毒素的毒性作用較弱,大致相同,可引起發熱、微循環障礙、內毒素休克及播散性血管內凝血等。


但是由于內毒素不是蛋白質,而是屬于脂多糖(LPS),能耐高溫,所以普通壓力蒸汽滅菌對它們起不了效果,一般采用干熱法160度2-4小時才能將其滅活。

由于是伴隨細菌而產生的,因而傳播方式與上述細菌傳播的方式一樣。
內毒素一般是進入人體才會產生作用,所以目前大多數只針對食品藥品,醫療器械等人體攝入性產品有要求。


我們主要是關注具、原料、接觸包裝、水源這幾個方面的內毒素情況,因為這幾個方面會直接接觸產品。

對于不能耐受濕熱蒸汽的物品,例如必須保持干燥的化學品和物品,金屬和玻璃器械,無水的油溶劑等只能采用干熱滅菌法。
干熱滅菌可以使用干熱滅菌箱或者干熱烘箱。

YAMATO擁有多系列的烘箱可用于干熱滅菌,分為自然對流和強制對流(風扇加速溫度均勻)形式,最大容積達到1000L,最高溫度達到260℃,時間最長達到1000h.


水源等溶劑,由于沸點低,并不能采用干熱滅菌方式,可以采用超濾、吸附或者蒸餾方式去除內毒素。
所以實驗用水方面要注意細菌微生物的指標,可以配備有雙波長紫外燈加超濾柱的純水機或超純水機。


廣州儀人儀器代理的賽多利斯超純水機arium pro VF就是這樣的一種純水機。
產出要求最嚴格的水,備有185 | 254 nm的雙波長紫外燈,可靠地去除有機物質(TOC),紫外線還能滅活微生物;超濾柱,用于去除內毒素、熱源、DNA 和RNA、RNase 和DNase。

使用截留分子量為5000D(5 kDa)的超濾膜,從水中去除大分子,使水中內毒素達到< 0.001EU/ml, RNases< 0.004ng/ml,DNases< 0.024 pg/μl,可拋棄式一次性航空水袋,避免微生物的附著和殘留,可用于DNA/RNA純化、體外受精、PCR實驗等分子生物學實驗。再配上Microsart二聯或多聯過濾系統,鱟試劑檢查,可檢查用水有無細菌和內毒素。


面對新型冠性病毒,實驗室更要注意做好細菌毒素污染措施。
更多實驗室細菌毒素污染相關的問題,歡迎留言撩小編哦~

希望疫情早日過去,大家生活恢復正軌。