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別八卦王寶強離婚案了，我們來看看蛋白分析的那些三氟乙酸要說最近全民媒體最狂熱討論的事項，非王寶強離婚案莫屬了。 從上周日(8月14日)凌晨，王寶強公布了自己與妻子馬蓉離婚的消息后，這個話題迅速上升為中國熱議話題的榜首。根據新浪微博的官方統計，話題#王寶強離婚#已經有超過50億的閱讀量。 至今已十多天了，熱度未消，而王寶強也空降微博明星榜第一位，引發全民關注。
大家最近在各平臺也看到不少有關的文章報導，有說婚姻的、有說法律的，甚至還有關于育兒的。然而這些跟我們的科研工作并沒有什么卵關系~ 大家在關注離婚案心疼寶寶的同時，跟著今天小編來點不一樣的吧，不講誰誰誰的馬蓉，只講講蛋白和多肽分析的那些三氟乙酸。
很多做過蛋白和多肽分析實驗的都知道，要往里面添加三氟乙酸。但三氟乙酸到底是什么東東呢？為什么要添加呢？對色譜柱壽命會有影響嗎？相信大部分實驗人員都還不大懂的?，F在，掌聲有請我們英俊瀟灑風流倜儻學貫中西的Dr.Lu。 Hi，我是Dr.Lu。廣州綠百草的專業技術人員。 今天我和美花花一起，和大家講解蛋白和多肽分析的那些三氟乙酸。  小Lu  美花花 大家好，我是花姐。真有點不好意思，又是我。 美麗的花姐，一周不見都有點想你了。
小Lu 美花花 小樣的，別貧嘴。趕緊的。講完我還要回去看寶寶呢。
美花花 呵呵。Dr.Lu，你還是直接上吧。 三氟乙酸（TFA）是一種強羧酸。pKa=-0.23。有輕微的毒性，化學反應式：CF3COF+H2O=CF3CO2H+HF。無色揮發性發煙液體。與醋酸氣味相似。有吸濕性及刺激臭。能與水、氟代烷烴、甲醇、苯、乙醚、四氯化碳和己烷混溶。
小Lu 美花花 Lu男神，真是不明覺厲。
美花花 LuLu歐巴，我今天做了多肽分析實驗。 效果怎樣？
小Lu 美花花 開始用普通流動相和C18色譜柱，拖尾異常嚴重。 肯定的，這主要是因為色譜柱中疏水鍵合相會殘留部分硅醇基，實驗中蛋白質和多肽會與其極性表面作用，從而導致拖尾。
小Lu 美花花 原來是這樣~ 后來前輩教我，要添加三氟乙酸。你能想象多神奇嗎？ 簡直是神仙水，峰型馬上棒棒噠。 流動相中的三氟乙酸可以跟剛剛說到的硅醇基以多種模式相互作用，從而改善峰形、克服峰展寬和拖尾問題。
小Lu
美花花 Dr.Lu，我知道離子修飾劑其實有很多，為啥做蛋白分析最好要用三氟乙酸？ 主要原因是三氟乙酸易揮發，能很方便的從制備樣品中出去。 另外，三氟乙酸的紫外最大吸收峰低于200nm，對多肽在低波長處的檢測干擾很小。
小Lu  美花花 哦~ 原來是易除去，干擾??！
美花花 小LuLu，這個問題我知道??！ 上次我做實驗，三氟乙酸添加在流動相中的濃度是 0.1%。 沒錯，一般是0.1%。 另外，改變三氟乙酸的濃度，可以細微地調整多肽在反相色譜上的選擇性哦~ 這一影響對于優化分離條件、增大復雜色譜分析（如多肽的指紋圖譜）的信息量是非常有益的。
小Lu 美花花 你說三氟乙酸是易揮發的，那濃度豈不是很難控制？ 恩恩，對的。如果配置時間長了，就會揮發一些，改變了濃度。所以配置好一定要封閉好，防止揮發呢。
小Lu 美花花 嗦嘎~
美花花 三氟乙酸真是蛋白分析的神仙水，那是不是倒越多越好？ 然而并不是。 前面我有提到，三氟乙酸是強酸，所以在實際使用過程中容易殘留從而導致色譜柱鍵合相水解加劇，減少柱子壽命。
小Lu 美花花 影響柱子壽命？？?。?！ 這問題可大了，我還是倒少點，安全??！ 汗~~??！ 當三氟乙酸濃度大大低于這個水平時，大部分色譜柱做出來的峰展寬和拖尾就變得十分明顯。特別是部分封端做得不大好的色譜柱，要添加很多才能達到要求。所以我們還是要根據不同色譜柱的情況，調整濃度哦~
小Lu 美花花 真是魚與熊掌不可兼得！ 那Dr.Lu，有沒有色譜柱是不用添加三氟乙酸，就能很好分析蛋白和多肽的呢？ 還是要看實驗的要求！ 有一些聚合物基質色譜柱，以及優化鍵合相C18色譜柱，在不添加三氟乙酸的情況下也能做出不錯的峰型。例如英國Hichrom旗下的ACE 300? 多肽分析反相 C18柱。 但是三氟乙酸會影響蛋白質和多肽的選擇性，一般都是建議加上，從而更好的保證峰型。
小Lu 美花花 恩恩，根據實驗要求匹配方案，才是正道呢。
以下是剛剛Dr.Lu提到的ACE色譜柱： ACE生物分析300?方法開發工具包（四） 該系列的超惰性特性體現在，如流動相中僅使用低至0.005％的TFA仍能保持很好的峰對稱度； 而市面上其他品牌的300?系列大多使用0.01％TFA表現出了很差的峰型，從而間接降低了靈敏度的運行能力。
1）甘氨酸 - 酪氨酸 2）催產素 3）血管緊張素Ⅱ 4）神經降壓素 各位親，蛋白質和多肽分析如何使用三氟乙酸，你懂了嗎？ 對本期的話題還有什么疑問嗎？對下期話題有什么建議？趕緊留言吧！Dr.Lu會很認真的解答各位的問題的哦~ 注：本文圖片和部分資料來源于網站。
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